转化的质粒加多少氮肥可以用水稀释？

一、最近做了连接转化,挑平板上的菌落摇菌后提质粒,单酶切可以切开,而且质 ...

质粒稀释100倍后PCR，有目的条带，也说明了是阳性克隆。有拖带，你可以把退火温度提高试试。后面上样9ul目的条带很浅，应该是你稀释倍数太高了。我一般是不稀释的，直接PCR，不过得看你提取质粒时加多少体积的水溶。我觉得不需要另外转入空载，PMD18-T vector的连接率挺高的。只要挑取阳性克隆抽质粒，经酶切、PCR后有目的条带就可以拿去测...

二、感受态细菌转化时需要多大的质粒浓度？

100-500ng/uL。质粒转化不少于10的5次方，连接产物不少于10的6次方。两种质粒是可以同时进入同一个感受态细胞的，比如构建腺病毒载体时。但是要求两种质粒进入同一个感受态细胞，转化效率非常低，一般需要电转或者其他的特殊处理。增加收菌次数，相对提高了质粒的量，这样的话裂解液的量可以适当增加；裂解...

三、一个目的基因在质粒上,如何将其扩增出来并做实时荧光定量PCR？

楼主提取质粒以后需要经过一次琼脂糖凝胶电泳定量，然后对质粒进行稀释，稀释到适当浓度，不然无法确定需要加多少DNA模版在才能满足反应体系的要求，引物设计没有别的要求，只要能完整扩出楼主想要的基因就行。定量的话，根据机器收到的荧光信号就可以定量了。以上仅个人愚见。

四、细菌的功与过

他把盛有肉汤的两个瓶子加热后，其中一个瓶子从顶端开口，瓶口不加盖，空气可在瓶内外流动；将另一个瓶子的瓶颈烧软并拉长弯曲成鹅颈状，且瓶口加盖。将这两个瓶中的肉汤煮沸后，静置一段时间，结果发现：第一个瓶子中的肉汤很快腐败变质，长出了很多细菌，而第二个瓶子中的肉汤经过很久也不变质，也...

五、高中生物知识点总结

大豆油根瘤菌不用氮肥 脱氨基主要在肝脏但也可以在其他细胞内进行 14.水肿:组织液浓度高于血液 15.尿素是有机物,氨基酸完全氧化分解时产生有机物 16.是否需要转氨基是看身体需不需要 17.蓝藻:原核生物,无质粒 酵母菌:真核生物,有质粒 高尔基体合成纤维素等 tRNA含CHONPS 18.生物导弹是单克隆抗体是蛋白质 19....

找全国竞赛生物

45.生物体自身代谢可产生水,是体内水分的来源之一。在下列几种酶催化的化学反应中,有水生成的是 ( A ) A.ATP合成酶 B.谷丙转氨酶 C.肠肽酶 D.脂肪酶46.在人体发育和新陈代谢中起重要作用,被人们称为生命元素的是 ( A ) A.Zn B.Fe C.Ca D.I47.某人喜欢晒太阳,但却经常出现抽搐,那么应建议他...

细菌的利与弊

革兰氏染色法:在固定的标本上,先用结晶紫(或龙胆紫)染色,再加碘液媒染(即助染),再用95%酒精脱色,最后用沙黄或稀释碱性复红液复染,结晶紫和碘形成不溶于水而溶于乙醇的复合物。凡能固定结晶紫和碘的复合物,不被酒精脱色而呈紫-黑紫色的,称为革兰氏阳性菌,如被酒精脱色后再被复红液复染成红色的,称为革...

小麦成熟多少天

(2)小麦全蚀病严重发生区,可选用12.5%硅噻菌胺(全蚀净)悬浮剂进行种子处理,对小麦全蚀病有很好的防治效果。一般用全蚀净一袋(20毫升),先兑水300-500毫升,可拌20-25斤种子,拌匀后闷种6-12小时(有利于药剂发挥并杀死种子所带病菌),在阴凉处晾干后播种。(3)小麦黄矮病和丛矮病发生区,可采用吡虫啉处理种子,...

生物基础

大豆油根瘤菌不用氮肥 脱氨基主要在肝脏但也可以在其他细胞内进行14.水肿:组织液浓度高于血液15.尿素是有机物,氨基酸完全氧化分解时产生有机物16.是否需要转氨基是看身体需不需要17.蓝藻:原核生物,无质粒 酵母菌:真核生物,有质粒 高尔基体合成纤维素等 tRNA含C H O N P S18.生物导弹是单克隆抗体是蛋白质19...