荧光光度法
一、从原理和仪器上比较紫外可见分光光度法与荧光分光光度法的异同点
在原理方面,紫外-可见分光光度法涉及的是分子对特定辐射能的选择性吸收,从基态或较低能级跃迁至较高能级,形成分子吸收光谱。而荧光分光光度法则关注的是分子吸收激发光后,由基态跃迁至单重激发态,再从激发态回到基态时产生的荧光发射。荧光光谱属于分子发射光谱,其独特之处在于激发态分子在返回基态时,会释放出部分能
二、紫外可见分光光度法与荧光光度法的区别
一、指代不同 1、可见分光光度法:通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析的方法。2、荧光光度法:根据物质的荧光谱线位置及其强度进行物质鉴定和含量测定的方法。二、特性不同 1、可见分光光度法:具有灵敏度高、操作简便、快速等优点,是生物化学实验中...
三、解释荧光光度法较吸收光度法灵敏度高的原因
一、灵敏度高:荧光分析法是一种基于分子荧光效应的检测方法,其灵敏度远高于传统的吸收光度法。荧光分析法通过测量荧光强度和激发光强度之间的比例关系,可以实现对被测物质的定量分析。由于荧光分析法具有较高的灵敏度,因此可以用于检测低浓度的物质。二、选择性好:荧光分析法具有较高的选择性,可以实现...
四、影响荧光分光光度法定量测定的主要因素有哪些?
影响荧光分光光度法定量测定的主要因素 1.激发光照射 有一些荧光物质若受到强光照射,会发生分解而导致F↓。所以,荧光分光光度计通常在激发光单色器后装配有光闸,在测定时才打开光闸让激发光照射样品池。2.温度 温度↑,荧光效率下降,F↓。因为,温度↑,增加分子间碰撞机会而使能量消耗掉。3.pH值...
五、荧光分光光度法和分光光度法的区别
两种方法的区别如下:1、荧光分光光度计有两个单色器,而一般紫外可见分光光度计只有一个单色器。2、荧光分光光度计的光源和检测器是成直角分布的,而紫外可见分光光度计是成一条直线的。3、荧光分光光度计是以氙灯做为光源,而紫外可见分光光度计是以氘灯作为紫外区光源,钨灯或卤钨灯作为可见光区...
荧光分光光度法测物质的含量时为什么要选择最大激发波长和最大荧光波长...
荧光分析法是一种高效测定物质含量的技术,其原理是利用物质在特定波长的激发光照射下发射荧光的特性。荧光光谱分析具有较高的灵敏度,尤其是与紫外光光度法或比色法相比。然而,为了获得最准确的测量结果,选择适当的激发光波长和荧光波长至关重要。选择最大激发波长和最大荧光波长的原因在于,当激发光波长...
荧光光度法
本法适用于海水、天然水中总硒的测定,若试样不经酸处理,可直接测定四价硒的含量。方法检出限为0.2μg/L。仪器和装置 荧光分光光度计。电动振荡器。试剂 盐酸。高氯酸。硫酸。去硒硫酸量取在搅拌下,徐徐加入200mL水中,加30mLHBr,混匀,置沙浴上加热至冒白烟。氢溴酸。氢氧化铵...
分子荧光光度法的被测物浓度要求
分子荧光光度法是一种用于测定溶液中特定分子浓度的分析方法,通常适用于含有具有荧光性质的化合物的样品。被测物浓度的要求因所使用的分子、荧光染料或标记物而异。以下是一些一般性的考虑因素:荧光强度和浓度关系: 荧光强度通常与被测物的浓度成正比关系,但这个关系可能是非线性的。在建立分光光度法时...
从原理和仪器上比较紫外可见分光光度法与荧光分光光度法的异同点
1.原理 相同点:吸光光度法和荧光分析法都是分子光谱。不同点:吸光光度法是由分子对辐射能选择性吸收由基态或较低能级跃迁到较高能级产生的分子光谱,是分子吸收光谱;而荧光分析法是由分子对辐射能选择性吸收由基态跃迁到单重激发态,当由其第一激发单重态的最低振动能级回到基态各振动能级间的跃迁...
紫外分光光度法和荧光分析法的区别和各自的优缺点?
1、原理不同:(1)紫外分光光度计,就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。(2)荧光分光光度法是根据物质的荧光谱线位置及其强度进行物质鉴定和含量测定。可根据不同的物质其组成与结构调整所吸收的紫外-可见光波长和发射光的波长。2、应用范围不同:(1)紫外分光...