鱼蛋白怎么跑电泳出来的?
1、鱼蛋白质中肌浆蛋白、肌原纤维蛋白怎么分别提取
我晕,加了胰蛋白酶不是全完了?我觉得应该是先用物理方法破坏肌细胞的生物膜,比如超声振荡什么的,使细胞松散,然后搞蛋白质电泳,这样还算是比较可行的,只是要多次提纯,电泳要求也较高。碱性蛋白质?当然是在碱性的环境里面电泳了,如果要求不高的话 具体过程我没做过,所以不敢给出
2、蛋白质分离纯化的四种方法
1、盐析法:盐析法的根据是蛋白质在稀盐溶液中,溶解度会随盐浓度的增高而上升,但当盐浓度增高到一定数值时,使水活度降低,进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐渐被破坏,最终引起蛋白质分子间互相凝聚并从溶液中析出。2、有机溶剂沉淀法:有机溶剂能降低蛋白质溶解度的原因有二:其一、...
3、蛋白质的等电点、水化层和双电层
数值范围:通常在5左右,但不同蛋白质的等电点有所不同,如山羊胃蛋白酶的等电点为3,而鱼精蛋白等碱性蛋白的等电点则在12附近。 特性:在等电点时,蛋白质的结构不稳定,溶解度极低,易形成沉淀。此时,蛋白质表现出最小的粘度、渗透性、膨胀性和导电性。电泳技术可以利用这一特性分离提纯蛋白质。
4、蛋白质的分离方法?
结果发现,聚丙烯酰胺电泳的条带分辨率低,加样量不高;等电聚焦电泳分辨率最高,可以分离同种蛋白的亚成分,加样量最小;等速提纯电泳区带分辨率较高,可将样品分成单一成分,加样量最大。 离子交换层析(Ion ,IEC)是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时...
5、蛋白质的等电点、水化层和双电层
等电点:定义:蛋白质的等电点是指蛋白质分子净电荷为零时的pH值。特性:大多数蛋白质的等电点偏向酸性,约为5左右,但不同蛋白质的等电点有所差异,如山羊胃蛋白酶的等电点低至3,而鱼精蛋白的等电点则在12附近。影响:在等电点时,蛋白质失去排斥力,溶解度下降,容易形成聚集,电泳性能减弱...
血蓝蛋白结构特点
通过柱结合聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和电镜技术,对中国鲎鱼血蓝蛋白进行深入研究,结果显示经过 G100纯化的血蓝蛋白在PAGE电泳中呈现出4个条带。进一步的DEAE-32层析分离出5个洗脱峰,每个峰在PAGE上又细分为4个条带。电镜观察下,血蓝蛋白分子显示出多种形态,包括环形、五角形、十字形和蝴蝶...
sds page原理
1)影响电泳的3因素:蛋白质的形状,大小和所带的电荷得多少 2)SDS是阴离子变性剂,与蛋白质结合后加热能把折叠的蛋白质打开(如果这个蛋白质是多亚基的话,比如2个亚基,处理后就形成两个多肽链),这样所有的蛋白质都有相似的形状和荷质比,这样就排除了蛋白质形状和所带电荷造成的影响,只跟蛋白...
蛋白质的等电点、水化层和双电层
当蛋白质处于等电点时,由于净电荷为零,它会失去排斥力,导致溶解度下降,容易形成聚集,粘度、渗透性和膨胀性也随之降低,电泳性能也随之减弱。因此,不同蛋白质的等电点差异,决定了它们在电场中的移动路径和速度,这是电泳技术分离提纯蛋白质的关键所在。蛋白质的电性质还受到溶液离子组成的微妙影响。
蛋白质的等电点、水化层和双电层
胃蛋白酶的等电点被误传为1,实际上其稳定pH范围为0.5-5,最适pH约1.8-4。蛋白质的等电点主要由肽链中氨基酸侧链的pK值决定,尽管接近但并不完全相同。在等电点时,蛋白质溶解度降低,易于聚集,表现出低粘度、渗透性和导电性,这使得电泳成为分离提纯蛋白质的常用手段。蛋白质的等电点受溶液...
血蓝蛋白的结构特点
柱结合聚丙烯酰胺凝胶电泳( gel ,PAGE)及电镜技术,研究中国鲎鱼血蓝蛋白()的结构特点,结果表明经 G100纯化的血蓝蛋白在PAGE电泳中出现4个条带],纯化的血蓝蛋白再经DEAE32层析得到5个洗脱峰,每个峰在PAGE电泳下可分辨出4个条带,电镜下...