生根农杆菌
一、培养农杆菌的利福平怎么配?
一般都用甲醇或DMSO配制,溶解度还是可以的,一般为20-50mg/ml稀释一千倍用;在配制后会有一些沉淀,在使用的时候混匀后用就可以了。甲醇和DMSO不会对农杆菌有影响。利福平的配制步骤如下:1. 从LB固体平板上,挑取含有目的基因的单菌落。2. 接种到3 ml LB液体培养基中,于恒温揭床上,27C,以180 r/min 的转
二、试述农杆菌介导的植物遗传转化中外植体培养主要有哪些阶段
在转化平板上挑取单菌落在1ml农杆菌培养基中培养。在50ml农杆菌培养基(含相应抗生素())中加入1ml上述培养物,200rpm,28℃培养5-6hr至OD600为0.6-1.0,培养结束前2hr加入乙酰丁香酮(AS,终浓度100uM)。取上述菌液在室温下,4000rpm,10min,弃上清,加入MS液体培养基(含AS 100uM...
三、如何高效做水稻遗传转化?
生根培养基:添加NAA或IBA,促进根系发育。3. 选择转化方法 农杆菌介导法:常用EHA105或LBA4404菌株,优化侵染条件(如菌液浓度、侵染时间、共培养时间)。基因枪法:适用于农杆菌不易侵染的品种,需优化金粉粒径、轰击压力等参数。4. 优化转化条件 预培养:外植体在侵染前预培养2-3天,提高转化效率...
四、请回答下列有关生物工程的问题:(1)用基因工程的方法培育抗虫棉,抗虫基 ...
(1)用基因工程的方法培育抗虫棉,抗虫基因导入受体细胞常用的方法是农杆菌转化法,该过程的受体细胞是离体的植物组织细胞,因此要进行植物组织培养.适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗生根,而与细胞分裂素配比适宜时可促进芽的生长.若要抑制试管苗的生长,促使愈伤组织产生和生长,需使用的生长调节剂...
转基因苹果培育易生根品种
转基因技术可以用于培育易生根的苹果品种。具体方法如下:利用发根农杆菌的TDNA区域导入特定质粒:科学家们将发根农杆菌的TDNA区域携带特定的RI质粒导入到难以生根的M26砧木中。转化后的植株表现出更为发达的根系,生根能力显著提升。利用Roib基因进行转化研究:通过基因工程技术,利用Roib基因对M26砧木进行...
叶盘法转化烟草的原理
这种转基因方法十分简单,一般是将植物的叶片切成小圆片,用农杆菌感染后共培养 2-4 天,而后转移到加有选择压的分化培养基上分化出芽,在 MS 培养基上生根后,再生出完整的植株。植物细胞利用Ti 转化常用的方法为叶盘法。叶盘法是一种简单易行的植物细胞转化、选择与再生的方法。具体做法是:先将...
植物被野生型农杆菌感染后会产生瘤状结构(类似愈伤组织),主要原因是...
A、除去生长素合成基因,瘤状结构会减小,但不会生根,A错误;B、由题意知,冠瘿碱基因合成的冠瘿碱是杆菌生命活动必需的有机物质,该有机物植物自身不能合成,因此去除除冠瘿碱合成基因,农杆菌在植物体内繁殖受抑制,B正确;C、由题意知,瘤状结构的形成原因是农杆菌的Ti质粒中含有生长素合成基因...
转基因苹果培育易生根品种
他们将发根农杆菌的T-DNA区域,携带了特定的RI质粒,导入M26砧木中。结果显示,这些转化后的植株表现出显著的优势,拥有更为发达的根系,生根能力得到了显著提升。进一步的研究中,Roib基因的发现为提高砧木生根提供了新的可能。等人利用Roib基因对M26砧木进行了转化研究。实验结果显示,转基因植株的...
如何从红豆杉中提取紫杉醇
这种方法为紫杉醇的生产提供了新的生物资源。6. 利用重组DNA技术提高产量: 通过利用发根农杆菌浸染红豆杉植物外植体诱导生根,并结合微生物合成途径中定向得到的关键酶和克隆红豆杉相关基因,可以降低紫杉醇合成对红豆杉的依赖程度,从而提高紫杉醇的产量。这种方法具有创新性和前瞻性。
如何从红豆杉中提取紫杉醇
6. 重组DNA技术法:利用重组DNA技术可以提高紫杉醇的产量。通过发根农杆菌浸染红豆杉植物外植体诱导生根,从微生物合成途径中定向得到关键酶和克隆红豆杉相关基因结合,可以降低紫杉醇合成对红豆杉的依赖程度。这种方法具有巨大的潜力,有望在未来实现紫杉醇的大规模生产。综上所述,紫杉醇的获取方法多种多样...